COLTURE CELLULARI ANIMALI: APPLICAZIONI, METODOLOGIE E TECNICHE DI LABORATORIO
cod. 1012292

Anno accademico 2024/25
3° anno di corso - Secondo semestre
Docente
Paolo LUNGHI
Settore scientifico disciplinare
Anatomia comparata e citologia (BIO/06)
Ambito
A scelta dello studente
Tipologia attività formativa
A scelta dello studente
38 ore
di attività frontali
3 crediti
sede: PARMA
insegnamento
in ITALIANO

Obiettivi formativi

La partecipazione alle attività formative previste (lezioni frontali ed esercitazioni pratiche di laboratorio) consentirà agli studenti del Corso di Studi in Scienze Biologiche di acquisire le conoscenze generali e le nozioni fondamentali per la coltura di cellule animali.
L'insegnamento si propone di descrivere i principi di base delle colture cellulari e del loro utilizzo in molti campi della sperimentazione biomedica e della diagnostica.
Il corso prevede una parte teorica che illustra:
1. Vantaggi e svantaggi delle colture di cellule animali rispetto alla sperimentazione con animali
2. Ottenimento e propagazione di linee cellulari: colture cellulari primarie e stabilizzate; linee cellulari ingegnerizzate.
3. Tipi di colture cellulari: mono e co-colture bi- e tridimensionali di cellule in sospensione ed in adesione.
4. Modelli cellulari utilizzati nel campo delle tecnologie biologiche e mediche
5. Architettura di un Laboratorio di colture cellulari e norme di sicurezza:
i) Corretto utilizzo di cappe biologiche, incubatori, centrifughe, pipette e pipettatori, reagenti e materiali per le colture cellulari.
ii) La contaminazione delle colture cellulari; Il rischio biologico associato alla manipolazione di cellule umane e le fondamentali procedure biohazard da utilizzare nel laboratorio; manutenzione, sterilizzazione e smaltimento rifiuti.
iii) Propagazione delle colture cellulari e cinetiche di crescita cellulare. Conta cellulare. Adesione cellulare e tripsinizzazione. Congelamento e scongelamento. Metodi di valutazione della proliferazione cellulare, sopravvivenza e tossicità. Test di vitalità.

Prerequisiti

Conoscenza dei programmi di Biologia cellulare, Biochimica.
Conoscenza dei principali aspetti della Biologia Generale con particolare riguardo alla struttura della cellula e alle sue componenti.

Contenuti dell'insegnamento

Il corso si propone di fornire conoscenze e competenze nell’ambito delle più moderne tecniche di coltura cellulare bi- e tridimensionale e delle loro applicazioni in campo biomedico. Inoltre permetterà ai partecipanti di acquisire capacità pratiche di lavoro in sterilità e manipolazione delle cellule animali.

Programma esteso

L'insegnamento si propone di descrivere i principi di base delle colture cellulari e del loro utilizzo in molti campi della sperimentazione nel campo delle tecnologie biologiche e mediche e della diagnostica.
Il corso prevede una parte teorica che illustra
1. Vantaggi e svantaggi delle colture di cellule animali rispetto alla sperimentazione con animali
2. Ottenimento e propagazione di linee cellulari: colture cellulari primarie e stabilizzate; linee cellulari ingegnerizzate
3. Modelli di colture cellulari: mono e co-colture bi- e tridimensionali di cellule in sospensione ed in adesione;
4. Modelli di colture cellulari applicazioni e finalità
5. Laboratorio di colture cellulari:
a) il rischio biologico associato alla manipolazione di cellule umane e le fondamentali procedure biohazard da utilizzare nel laboratorio
b) utilizzo di reagenti e materiali per colture cellulari; composizione dei principali terreni di coltura cellulare e loro preparazione
c) utilizzo di cappe biologiche, incubatori, centrifughe, pipette e pipettatori
d) preparazione dei terreni di coltura
e) allestimento di una coltura, conta cellulare, subcoltivazione e stimolazione cellulare
f) analisi della vitalità cellulare mediante camera di conta Neubauer
g) congelamento e scongelamento delle cellule animali
h) La contaminazione delle colture cellulari.

Bibliografia

Metodi didattici

L’insegnamento si compone di lezioni frontali e di una parte di esercitazione di laboratorio.
Le esercitazioni di laboratorio sono mirate all’approfondimento e attuazione pratica delle corrette tecniche di base di manipolazione di colture cellulari,

In particolare saranno sviluppati esercizi a piccoli gruppi (4 studenti max) per la determinazione di:
• Semina cellule
• Tripsinizzazione
• Conta cellule con trypan blue
• Familiarizzazione con i cacoli per le diluizioni
• Vitalità cellulare in seguito a differenti trattamenti.

Modalità verifica apprendimento

Lo studente dovrà essere in grado di:
• Comprendere le finalità della pratica di colture cellulari
• Conoscere i principi che dettano la corretta pratica di colture cellulari
• Acquisire capacità pratiche di lavoro in sterilità, manipolazione delle cellule e misura di alcuni parametri.
• Acquisire la capacità di osservare correttamente un preparato al microscopio ottico invertito [capacità di mettere a fuoco a differenti ingrandimenti (10X, 20X e 40X) colture cellulari che crescono in monostrato o in sospensione].
La modalità di esame per la valutazione del raggiungimento da parte dello studente degli obiettivi prefissati dal corso avverrà con una verifica scritta.
La prova scritta consisterà in tre domande a risposta aperta inerenti agli argomenti affrontati a lezione + un problema che avrà 2 quesiti:
1) il calcolo per una corretta semina cellulare (argomento affrontato durante le esercitazioni pratiche di laboratorio)
2) il calcolo per una corretta diluizione di un farmaco (argomento affrontato a lezione e durante le esercitazioni pratiche di laboratorio).
E' attribuito un punteggio massimo pari a “8 punti” per ogni risposta aperta corretta e di un punteggio massimo pari a “8 punti” per il problema (4 punti per ciascun calcolo corretto).

Altre informazioni

Obiettivi agenda 2030 per lo sviluppo sostenibile

- - -